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抗原的標(biāo)記

1.放射性同位素的選擇 選擇同位素的原則。

⑴ 定方法簡單、經(jīng)濟(jì)、便于推廣應(yīng)用。

⑵ 易于防護(hù)。

⑶ 同位素與標(biāo)記物結(jié)合好，不易從標(biāo)記物上脫落。

⑷ 對(duì)標(biāo)記物不引起輻射損傷，使蛋白變性。

⑸ 具有較高的計(jì)數(shù)效率。

目前常用的同位素有3H、125 I，其它還有14C、35S和32P等。① 3H 因所有的有機(jī)化合物中均含有氫，用3H來置換氫，不至于影響其原有化合物的化學(xué)性質(zhì)。3H的半衰期長，是一個(gè)弱 衰變，能量低，便于防護(hù)。一次標(biāo)記可以使用較長時(shí)間，采用閃爍儀測(cè)量，測(cè)量效力可達(dá)60%。3H標(biāo)記要求條件較高，一般需由專門機(jī)構(gòu)來承擔(dān)，不易推廣;② 125I 碘標(biāo)記的化合物比度高，標(biāo)記方法簡便，而且標(biāo)記物可在碘化na晶體﹟型計(jì)數(shù)器上直接測(cè)定。125I發(fā)射 射線，含有酪氨酸的蛋白質(zhì)和多肽均可用放射性I標(biāo)記。目前，連接標(biāo)記技術(shù)已有相當(dāng)發(fā)展，致使許多非蛋白質(zhì)和多肽的半抗原也可以用碘來標(biāo)記。另外碘的放射能量較大，半衰期也較短。

雖然125I的放射比活性僅為131I的13%，但125I的半衰期較131I長，同位素豐度大，輻射損傷小，計(jì)數(shù)效率也較高，因此125I比131I更為常用。

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